能将微量的DNA大幅增加,是分子生物学研究和实验的常规方法,PCR实验室广泛应用于生物学各个领域,例如:艾滋病检测,乙型肝炎,禽疫病,癌基因的检测和诊断,DNA指纹,个体识别,亲子鉴定及法医物证等等今天为大家进行详解。今天兰州实验室设计单位讲解下pcr实验室设计的基本原则。

pcr实验室建设
pcr实验室建设

一、PCR实验室布局

PCR实验室原则上为试剂准备区,样品制备区,扩增区和扩增产物分析区四个单独的工作区域,并设有专用走廊,各工作区域应设缓冲间,工作区与缓冲间宜安装连锁装置。不同功能的工作区应是分隔独立的,各工作区有明显的标志,不能直通,如果紧密连接,需安装物品传递窗。前两区为扩增前区,后两区为扩增后区,即从:试剂准备区一样品制备区一 PCR 扩增室一产物分析室 ,不得逆向流动。实验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区,不得逆向流动。各工作区顶部应该安装紫外灯,紫外灯波长为254mm,每20m一支40W的紫外灯。

二、实验室各区功能及主要设备

1.试剂准备区:主要进行试剂的制备,分装和主反应混合液的制备。试剂盒用于样品制作的材料应直接运送至该区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的试剂。本区主要设备有天平,冰箱,离心机,加样器,振荡器等。对于气流压力的控制,本区并没有严格的要求, 一般为+10Pa。

2.样品制备区:主要进行样品的保存,核酸提取,贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区主要设备有冰箱,生物安全柜,离心机,加样器,振荡器等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染, 一般为+10Pa.

pcr实验室分区设计
pcr实验室分区设计

3.扩增区:主要进行DNA扩增。此外,已制备的DNA模板(来.自样品制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区主要设备有:扩增仪,冰箱,离心机,加样器等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶从本区漏出一般为一25Pa。

4.扩增产物分析区:扩增产物的测定。本区主要设备有酶标仪,洗板机、加样器和水浴箱等。本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,一般为一25Pa,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。

三、PCR实验室通风系统及压力控制

各区域之间应具备单间的实验工艺流,物流,人流与气流,形成单向流程的保护屏障, 避免实验室之间的相互干扰,防止气溶胶扩散对实验过程造成污染。PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式,严格控制送,排风的比例以保证个实验区的压力要求。

四、PCR实验室装饰

实验室围护结构应牢固, 气密性好;所有阴阳角宜采用圆弧过度;墙体内壁光洁,不积尘,耐腐蚀,易清洗消毒;地面使用PVC卷材或环氧树脂自流坪,材料应满足无缝隙,无渗漏,光洁,耐腐蚀的要求。

pcr实验室装修设计
pcr实验室装修设计

五、PCR实验室设计注意事项

1.几个区域的大小设置情况,试剂准备区,扩增区,扩增产物分析区,空间可以相对小一些,样品制备区要放置生物安全柜和低温冰箱,空间应大一些。

2.试剂准备区,样品制备区设紧急洗眼器,以保证操作人员的安全。

3.PCR实验室设计时需要根据工艺要求和功能配置选择一定数量的通风机,兼作部分排风罩。 通常,校正的通风次数远远超过10次,一般在20-30次以上,满足通风次数的要求。 但是,这个换气次数是根据通风机的开放面积计算出的换气量, 因此,也要检查通风机较小开面积时的通风量和换气次数,如果低于换气次数的要求,则追加综合排气系统。

4.通风机风量平衡可以采用排风量一定、送风量和门窗间隙补充风量一定的定风量控制系统。 该方法适用于较大排风量满足较小换气次数要求的实验室。

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